原理
改良半叶法系将植物对称叶片的一部分遮光或取下置于暗处,另一部分则留在光下进行光合作用,过一定时间后,在这两部分叶片的对应部位取同等面积,分别烘干称重。因为对称叶片的两对应部位的等面积的干重,开始时被视为相等,照光后叶片重量超过暗中的叶重,超过部分即为光合作用产物的产量,并通过一定的计算可得到光合作用强度。
仪器药品
分析天平 烘箱
剪刀 称量皿
刀片 金属模板
纱布 锡纸
三氯乙酸
操作步骤
1.选择测定样品
在田间选定有代表性植株叶片(如叶片在植株上的部位、叶龄、受光条件等)20张,用小纸牌编号。
2.叶子基部处理
为了不使选定叶片中光合作用产物往外运,而影响测定结果的准确性,可采用下列方法进行处理:
(1) 可将叶子输导系统的韬皮部破坏。如棉花等双子叶植物的叶片,可用刀片将叶柄的外皮环割约0.5cm宽。
(2) 如小麦、水稻等单子叶植物,由于韧皮部和木质部难以分开处理,可用刚在开水中浸过的纱布或棉花做成的夹子,将叶子基部烫伤一小段即可(一般用90℃以上的开水烫20秒)。
(3) 由于棉花叶柄木质化程度低,叶柄易被折断。用开水烫,又难以掌握烫伤的程度,往往不是烫得不够便是烫得过重而叶片下垂,改变了叶片的角度。因此可改用化学方法来环割,选用适当浓度的三氯乙酸,点涂叶柄以阻止光合产物的输出。三氯乙酸是一种强烈的蛋白质沉淀剂,渗入叶柄后可将筛管生活细胞杀死,而起到阻止有机养料运输的作用。三氯乙酸的浓度,视叶的幼嫩程度而异。以能明显灼伤叶柄,而又不影响水分供应,不改变叶片角度为宜。一般使用5%三氯乙酸。
为了使烫后或环割等处理后的叶片不致下垂,影响叶片的自然生长角度,可用锡纸或塑料管包围之。使叶片保持原来着生角度。
3.剪取样品
叶基部处理完毕后,即可剪取样品,记录时间,开始光合作用测定。一般按编号次序分别剪下对称叶片的一半(主脉不剪下),按编号顺序夹于湿润的纱布中,贮于暗处。过4─5小时后,再依次剪下另外半叶,同样按编号夹于湿润纱布中,两次剪叶的速度应尽量保持一致,使各叶片经历相等的照光时数。
4.称重比较
将各同号叶片之两半按对应部位叠在一起,在无粗叶脉处放上已知面积(如棉花可用1.5×2cm)的金属模板,用刀片沿边切下两个叶块,分别置于照光及暗中的两上称量皿中,80─90℃下烘至恒重(约5小时),在分析天平上称重比较。
5.计算结果
叶片干重差之部和(mg)除以叶面积(换算成dm2,1dm2=100cm2)及照光时数,即得光合作用强度,以干物质,mg/(dm2?h)表示之。
计算公式如下:
由于叶内贮存的光合产物一般为蔗糖和淀粉等,可将干物质重量乘系数1.5,得二氧化碳同化量,单位为CO2,mg/(dm2?h)。
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