一、植物组织培养
考点解读:①植物组织培养最终产生新个体,体现了植物细胞的全能性。②植物细胞表现出全能性必须满足的条件包括:植物组织或细胞处于离体状态下;外部环境条件适宜,如温度、PH、光照、无菌操作;必要的营养条件,如水、有机营养、矿质营养、维生素等营养物质和植物激素。③愈伤组织的细胞排列疏松、无规则,是高度液泡化的、呈无定型状态的薄壁细胞,无叶绿体,不能进行光合作用,需要从外界获取有机营养。④脱分化,又叫去分化,是指由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程;再分化是指愈伤组织继续培养,重新分化成根或芽等器官的过程。⑤植物组织培养需要生长素和细胞分裂素,其中生长素可诱导愈伤组织生根,细胞分裂素可促进愈伤组织生芽。⑥若制作人工种子,应进行到胚状体阶段;若获得紫草素(代谢产物),应进行到愈伤组织阶段。⑦单倍体育种首先要进行花药离体培养,仍是采用植物组织培养技术,然后用秋水仙素处理,获得纯合子,后代无性状分离,能够稳定遗传,可明显缩短育种年限。
二、植物体细胞杂交
考点解读:①原生质体的制备采用酶解法,即用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁,获得有活力的原生质体。②诱导原生质体融合,采用物理法(离心、振动、电激)或化学法(聚乙二醇PEG),原生质体融合完成的标志是再生出新的细胞壁。③植物体细胞杂交的理论基础为细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。它能克服远缘杂交不亲和的障碍,打破物种之间的生殖隔离、扩大遗传重组范围。④融合细胞的类型既有AB型杂种细胞,还能形成AA型和BB型两种融合细胞,但只有AB型细胞是植物体细胞杂交所形成的杂种细胞,因此在杂种细胞形成后还应有一个筛选过程。
三、动物细胞培养
考点解读:①动物细胞培养的原理是细胞增殖,培养过程中细胞进行有丝分裂,不涉及减数分裂。 结果是获得细胞群。②用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理培养细胞,而不能用胃蛋白酶,消化处理时间要适当,否者会损伤细胞。③动物细胞培养液的成分包括糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚,所以通常需要加入血清、血浆,以提供一个类似生物体内的环境,此外动物血清中也包含了一些动物的激素和酶,可以促进细胞的生长。④原代培养是指细胞悬浮液第一次在瓶中培养,没有分瓶之前的细胞培养,即第1代细胞的培养与传10代以内的的细胞培养;传代培养是指细胞悬浮液培养一段时间后,分瓶再进行的细胞培养,即传10代以后的细胞培养。
四、动物体细胞核移植
考点解读:①供体细胞一般选优良动物的传代培养10代以内的细胞,因为10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型。②选用去核卵母细胞的原因是其含有能促进体细胞核全能性表达的物质;营养物质多,供胚胎早期发育;体积大,便于操作。③动物体细胞核移植技术利用动物细胞核的全能性,获得克隆动物,属于无性繁殖的方法。其主要应用有:加速良种繁育;保护濒危物种;生产医用蛋白;提供克隆组织、器官。④克隆动物的性状与供体动物基本相同,少数性状与提供卵母细胞的动物相同,与代孕动物的性状无遗传关系。
五、单克隆抗体的制备
考点解读:①单克隆抗体是指由单个B细胞通过无性繁殖(克隆)形成细胞群,由它们产生出化学性质单一、特异性强的抗体。②单克隆抗体制备过程中有两次筛选,第一次筛选用选择性培养基筛选出杂交瘤细胞;第二次筛选通过抗体检测筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。③杂交瘤细胞既能在体内迅速大量繁殖,又能产生专一的抗体。④单克隆抗体的制备原理为细胞膜的流动性和细胞增殖,诱导动物细胞融合的方法包括物理方法(电刺激、离心、振动等)、化学方法(PEG处理)和生物方法(灭活的病毒处理)。⑤“生物导弹”是由抗癌细胞的单克隆抗体和放射性同位素、化学药物或细胞毒素结合构成,借助单克隆抗体的导向作用,将药物定向带到癌细胞所在位置,在原位杀伤癌细胞。
作者简介:周伟,生物奥赛主教练。主要从事生物教学与奥赛培训研究,近年来在《生物学教学》、《中学生物教学》、《吉首大学学报》、《新高考》、《中学生理科应试》、《青苹果》、《当代中学生报》、《考试报》、《素质教育报》、《中学生理化报》、《中学生学习报》等报刊上发表文章100多篇。
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